綿陽無塵室沉降菌測試標準操作規(guī)程

發(fā)布時間：2023-06-26 21:41:49 人氣：18676

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沉降菌測試標準操作規(guī)程

1、菌落：細菌培養(yǎng)后，由一個或幾個細菌繁殖而形成的一細菌集落，簡稱CFU。通常用個數(shù)表示。

2、測試方法：沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)48小時以上培養(yǎng)，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù)，來評定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定無塵室的潔凈度。

3、所用的儀器和設(shè)備

1）高壓消毒鍋：使用時參照文件GZ-ZL-SOP-066-00進行操作。

2）恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。

3）培養(yǎng)皿：一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。使用前將培養(yǎng)皿置于121℃濕熱滅菌20分鐘。

4、培養(yǎng)基：普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基加熱熔化，冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15m1。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后，將培養(yǎng)基平皿放入30～35℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)數(shù)小時，若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長，即可供采樣用，制備好的培養(yǎng)基平皿應在2～8℃的環(huán)境中存放。

5、測試步驟

1）采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預先確定的取樣點，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時，再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置。
2）培養(yǎng)，時間不少于48小時。每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢查培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。

3）菌落計數(shù)：用肉眼直接計數(shù)，然后用5～10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。

6、注意事項

1）測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。

2）采取一切措施防止人為對樣本的污染。

3）對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。

4）由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。

5）采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應剔除。

7、測試規(guī)則

1）測試狀態(tài)

（1）沉降菌測試前：被測試無塵室（區(qū)）的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差、必須控制在規(guī)定值內(nèi)。被測試無塵室（區(qū)）已消毒。

（2）測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，并在報告中注明測試狀態(tài)。

（3）測試人員：測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于2個人。

2）測試時間

（1）對單向流，如100級凈化房間內(nèi)及層流工作臺，測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10分鐘后開始。

（2）對非單向流，如10000級、100000級以上的凈化房間，測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘開始。

8沉降菌計數(shù)
1）最少采樣點數(shù)目：可按表1確定。在滿足最少測點數(shù)的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表2。??表1最少采樣點數(shù)目

面積(m2)?	潔凈度級別
	100?	10000?	100000?	300000
＜10?	2～3?	2?	2?	2
≥10～＜20?	4?	2?	2?	2
≥20～＜40?	8?	2?	2?	2
≥40～＜100?	16?	4?	2?	2
≥100～＜200?	40?	10?	3?	3